Опыт применения прямой MALDI-TOF масс-спектрометрии для экспресс-идентификации положительных гемокультур

Назад к программе

Овсеенко С. Т., Попов Д. А., Вострикова Т. Ю.

ФГБНУ "НЦ ССХ им. А.Н. Бакулева";

Цель: оценить эффективность прямой идентификации возбудителей бактериемии с помощью прямой MALDI-TOF масс-спектрометрии. Методы: в исследование включено 211 положительных гемокультур, полученных от 116 пациентов (106 взрослых и 10 детей) в возрасте от 2 недель до 77 лет, находящихся в ОРИТ после операций на открытом сердце. Инкубация осуществлялась в аэробных флаконах с сорбентом для антибиотиков с помощью анализатора BacT/ALERT 3D 120 (bioMerieux, Франция). Параллельно с рассевом первичных гемокультур на плотные питательные среды с последующей идентификацией чистых культур с применением MALDI-TOF масс-спектрометрии на анализаторе Vitek MS, bioMerieux, Франция (рутинный метод), после соответствующей пробоподготовки осуществляли прямое (без предварительного рассева) MALDI-TOF масс-спектрометрическое исследование монокомпонентных гемокультур (n=201). Результаты: с применением рутинного метода в 211 положительных гемокультурах идентифицировано 23 вида микроорганизмов (стафилококки (n=87), энтеробактерии (n=71), энтерококки (n=20), неферментирующие грамотрицательные бактерии (n=18), прочие (n=5). Среднее время инкубации образцов составило 16,2±7,4 ч (от 3,75 до 51 ч). При прямом масс-спектрометрическом анализе монокомпонентных гемокультур (n=201) корректно определено до вида 153 образца (76,1%), при этом доля успешных идентификаций грамотрицательных бактерий была выше, чем грамположительных (85,4 и 69,1% соответственно, p=0,01). Выявлена высокая степень согласованности результатов стандартного и прямого методов идентификации гемокультур с помощью MALDI-TOF масс-спектрометрии (κ=0,96, p<0,001; в расчет включены образцы, для которых оба варианта дали результат). Случаи неудачной прямой идентификации гемокультур (n=48) в своем большинстве (89,6%) были связаны с невозможностью соотнесения полученного при анализе образца масс-спектра с библиотечным. В остальных 5 случаях выявлено расхождение результатов, при этом в трех пробах отмечено несовпадение вида микроорганизма, не имеющее клинического значения (S. haemolyticus (n=2) и S. hominis (n=1) по данным масс-спектрометрического анализа и S. epidermidis в посеве), в двух случаях микроорганизм идентифицирован неправильно (Mycobacterium kansasii и Burkholderia vietnamensis вместо S. epidermidis и S. hominis соответственно). Среди включенных в исследование образцов было 10 смешанных культур, которые также были подвергнуты прямому масс-спектрометрическому анализу. При этом в 7 случаях (70%) был определен до вида один микроорганизм из ассоциации, в 2 случаях имела место корректная идентификация одного из микрорганизмов до рода, еще в одной пробе результат получен не был. Временные затраты на проведение прямого масс-спектрометрического анализа, включая пробоподготовку, составляли не более 1 ч. Вывод: метод прямой MALDI-TOF масс-спектрометрии позволяет значимо ускорить идентификацию гемокультур, что может способствовать максимально раннему назначению эффективных режимов стартовой антибиотикотерапии.

Комментарии посетителей

нет комментариев
Комментарии могут отправлять участники данного мероприятия или члены Ассоциации.